MOQ: | 5 bộ dụng cụ |
giá bán: | Có thể thương lượng |
Bao bì tiêu chuẩn: | đóng gói màu |
Thời gian giao hàng: | 5-7 ngày |
phương thức thanh toán: | T/T |
khả năng cung cấp: | 100 bộ mỗi tháng |
REAGENTMBộ thử nghiệm ELISA Kanamycin là một enzyme immunoassay cạnh tranh để phân tích định lượng Kanamycin trong thịt / gan / thận, lysate tế bào, nước tiểu, huyết thanh và sữa.
Phân hồi cao (> 80%), nhanh (10-40 phút) và phương pháp chiết xuất hiệu quả.
Giới hạn phát hiện là 0,2 ng/g.
Khả năng tái tạo cao.
Xét nghiệm ELISA nhanh (ít hơn 1 giờ bất kể số lượng mẫu).
Phương pháp dựa trên phân tích ELISA màu cạnh tranh. Kanamycin-BSA đã được phủ trong các hố đĩa. Trong quá trình phân tích,mẫu và kháng thể Kanamycin (Antibody # 1) và HRP-Conjugate (HRP-Conjugated Antibody # 2) được thêm vào các giếng để ủNếu các dư Kanamycin có mặt trong mẫu, nó sẽ cạnh tranh với Kanamycin trên các hố đĩa cho các kháng thể Kanamycin, các kháng thể thứ cấp, gắn thẻ với một enzyme peroxidase,nhắm mục tiêu các kháng thể chính mà là phức tạp để thuốc phủ trên các giếng đĩaĐộ cường độ màu kết quả, sau khi thêm chất nền HRP (TMB), có mối quan hệ ngược với nồng độ dư lượng Kanamycin trong mẫu.
REAGENTMBộ thử nghiệm ELISA Kanamycin có khả năng xác định 96 hoặc thử nghiệm 42 mẫu trong hai bản (giả sử 12 giếng cho tiêu chuẩn).Trở lại bất kỳ microwell không sử dụng vào túi nhựa và niêm phong chúng bằng chất khô cung cấp trong gói ban đầu. Lưu trữ bộ ở nhiệt độ 2- 8 °C *. Thời hạn sử dụng là 12 tháng khi bộ được lưu trữ đúng cách.
Nội dung bộ dụng cụ | Số tiền | Lưu trữ |
Bảng phủ canamycin | 1 x 96 giếng | 2-8°C |
Tiêu chuẩn Kanamycin Kiểm soát tiêu cực (tuốc CAP màu trắng) 0.2 ng/mL (chuỗi CAP màu vàng) 0.6 ng/mL (chuối CAP màu cam) 1.8 ng/mL (đường ống nắp màu hồng) 5.4 ng/mL ((đường ống mũ màu tím) 16.2 ng/mL (đường ống mũ màu xanh) 1000 ng/mL ((tăng, tùy chọn, ống mũ đỏ) |
1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml |
2-8°C
|
Kanamycin Ab#1 | 6.0mL | 2-8°C |
HRP-Conjugated Ab#2 | 6.0mL | |
10×Điều pha loãng mẫu | 15 ml | |
20× dung dịch giặt | 28mL | |
Dừng Buffer | 12 ml | |
TMB Substrate | 12 ml | |
10 × Bộ đệm mở rộng mẫu (không cần thiết) | 15ml | |
Chất dự phòng cân đối mẫu | 2 ml |
Nếu bạn không có kế hoạch sử dụng bộ dụng cụ trong hơn 1 tháng, hãy lưu trữ Kanamycin Standard Stock, Kanamycin Antibody #1 và HRP-Conjugated Antibody #2 ở nhiệt độ -20°C hoặc trong tủ lạnh.
Loại mẫu | Giới hạn phát hiện(ng/g hoặc ppb) |
Cá/ Tôm/ Thịt/ Gan/ thận | 8 |
Cell Lysate | 2 |
Nước tiểu / huyết thanh | 5 |
Sữa | 2 |
Các chất phân tích | Khả năng phản ứng chéo (%) |
Kanamycin | 100 |
Streptomycin | < 0.1 |
Dihydrostreptomycin | < 0.1 |
Neomycin | < 0.1 |
Máy đọc đĩa microtiter (450 nm)
Máy trộn mô (ví dụ Omni Tissue Master Homogenizer)
Máy trộn xoắn ốc (ví dụ: Máy trộn xoắn ốc Genie từ VWR)
10, 20, 100 và 1000 IU pipette
Đường ống thông đa kênh: 50-300 IU (Tìm chọn)
Hãy chắc chắn rằng các mẫu được lưu trữ đúng cách. Nói chung, các mẫu nên được giữ trong tủ lạnh ở nhiệt độ 2-4 °C trong không quá 1-2 ngày. Tự đông các mẫu ở nhiệt độ tối thiểu -20 °C nếu cần lưu trữ trong thời gian dài hơn.Các mẫu đông lạnh có thể được tan ở nhiệt độ phòng (20 °C / 68 °F) hoặc trong tủ lạnh trước khi sử dụng.
Lấy 100 IU lysate tế bào, thêm 900 IU của 1 × mẫu pha loãng đệm, trộn tốt.
Tránh tâm trong 5 phút ở 4000 x g.
Lấy 50 I.U. của supernatant cho mỗi giếng để xét nghiệm.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 10.
Để 1,0 g của mẫu đồng nhất, thêm 4.0mL của 1 × Sample Ext. bộ đệm,
Lôi động mẫu trong 1 phút với máy trộn xoáy.
Phân tâm mẫu trong 5 phút ở 4000 x g.
Cẩn thận chuyển 200uL của lớp trên vào một ống mới,thêm 1.375mL 1X chất pha loãng mẫu và 25uL Sample Balance Buffer, xoáy trong 30 giây.
Sử dụng 50uL mỗi giếng để phân tích.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 40.
Lấy 50uL mẫu nước tiểu hoặc huyết thanh, thêm 1,2 ml chất pha loãng 1 lần mẫu, trộn kỹ.
Tránh tâm trong 5 phút ở 4.000 x g.
Lấy 50uL của supernatant cho mỗi giếng để xét nghiệm.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 25.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng:10
Quan trọng: Tất cả các chất phản ứng phải được đưa đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng (1 2 giờ tại20 25°C / 68 ¢ 77°F); Hãy chắc chắn đọc phần " Cảnh báo và biện pháp phòng ngừa " trêntrang3.Các dung dịch nên được chuẩn bị ngay trước khi thử nghiệm ELISA. Tất cả các phản ứng nên được trộn bằng cách đảo ngược nhẹ hoặc xoay trước khi sử dụng. Chuẩn bị khối lượng cần thiết cho số lượng giếng đang chạy.Không trả lại các chất phản ứng vào ống/thùng chứa ban đầuSử dụng hồ chứa dùng một lần khi xử lý chất phản ứng có thể giảm thiểu nguy cơ nhiễm trùng và được khuyến cáo.
Trộn 1 khối lượng dung dịch rửa 20X với 19 khối lượng nước cất.
Nhãn các dải riêng lẻ sẽ được sử dụng và các chất phản ứng theo ví dụ sau:
Thành phần | Khối lượng mỗi phản ứng | 24 Phản ứng |
Kháng thể Kanamycin #1 | 50uL | 1.2mL |
HRP-Conjugated Ab #2 | 50uL | 1.2mL |
1X dung dịch giặt | 10,0 mL | 24ml |
Dừng Buffer | 100 IU | 2.4 ml |
TMB Substrate | 100 IU | 2.4 ml |
Thêm 50 IU của mỗi tiêu chuẩn Kanamycin trong hai lần vào các giếng khác nhau (Thêm tiêu chuẩn vào đĩa chỉ theo thứ tự từ nồng độ thấp đến nồng độ cao).
Thêm 50 IU của mỗi mẫu trong hai lần vào các giếng lấy mẫu khác nhau.
Thêm 50 IU HRP-Conjugated Ab # 2 vào mỗi giếng và 50 IU Kanamycin Antibody #1 vào mỗi giếng. Trộn tốt bằng cách nhẹ nhàng lắc tấm bằng tay trong khoảng 30 giây.
ủ đĩa trong 30 phút ở nhiệt độ phòng (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F). (Tránh ánh nắng mặt trời trực tiếp và băng giá trên ghế bành trong thời gian ủ (được khuyến cáo che tấm microtiter trong khi ủ).
Rửa đĩa 4 lần với 250 IU dung dịch giặt 1X. Sau lần rửa cuối cùng, đảo ngược đĩa và nhẹ nhàng nhấn đĩa khô trên khăn giấy (Làm bước tiếp theo ngay sau khi rửa đĩa.Không cho phép tấm khô trong không khí giữa các bước làm việc).
Thêm 100 IU chất nền TMB. Thời gian phản ứng ngay sau khi thêm chất nền. Trộn dung dịch bằng cách nhẹ nhàng lắc tấm bằng tay trong 30s trong khi ủKhông đặt bất kỳ chất nền nào trở lại thùng chứa ban đầu để tránh bất kỳ sự ô nhiễm tiềm ẩn nào.Nên che tấm microtiter trong khi ủ).
Sau khi ủ trong 15 phút ở nhiệt độ phòng (20 25°C / 68 ¢ 77°F), thêm 100 IU Stop Buffer để ngăn chặn phản ứng enzyme.
Đọc bảng hiệu càng sớm càng tốt sau khi thêm Stop Buffer trên máy đọc bảng hiệu với bước sóng 450 nm (Trước khi đọc,sử dụng khăn lau không có lông trên đáy của tấm để đảm bảo không có độ ẩm hoặc dấu vân tay can thiệp vào các phép đọc).
Một đường cong tiêu chuẩn có thể được xây dựng bằng cách vẽ đường viền hấp thụ tương đối trung bình (%) thu được từ mỗi tiêu chuẩn tham chiếu so với nồng độ của nó bằng ng / mL trên đường cong logaritm.
Sự hấp thụ tương đối (%) =tiêu chuẩn hấp thụ bằng khônghoặc mẫu x 100
Sử dụng các giá trị hấp thụ tương đối trung bình cho mỗi mẫu để xác định nồng độ tương ứng của thuốc được thử nghiệm bằng ng/mL từ đường cong tiêu chuẩn.
Hình sau là đường cong tiêu chuẩn chloramphenicol điển hình.
MOQ: | 5 bộ dụng cụ |
giá bán: | Có thể thương lượng |
Bao bì tiêu chuẩn: | đóng gói màu |
Thời gian giao hàng: | 5-7 ngày |
phương thức thanh toán: | T/T |
khả năng cung cấp: | 100 bộ mỗi tháng |
REAGENTMBộ thử nghiệm ELISA Kanamycin là một enzyme immunoassay cạnh tranh để phân tích định lượng Kanamycin trong thịt / gan / thận, lysate tế bào, nước tiểu, huyết thanh và sữa.
Phân hồi cao (> 80%), nhanh (10-40 phút) và phương pháp chiết xuất hiệu quả.
Giới hạn phát hiện là 0,2 ng/g.
Khả năng tái tạo cao.
Xét nghiệm ELISA nhanh (ít hơn 1 giờ bất kể số lượng mẫu).
Phương pháp dựa trên phân tích ELISA màu cạnh tranh. Kanamycin-BSA đã được phủ trong các hố đĩa. Trong quá trình phân tích,mẫu và kháng thể Kanamycin (Antibody # 1) và HRP-Conjugate (HRP-Conjugated Antibody # 2) được thêm vào các giếng để ủNếu các dư Kanamycin có mặt trong mẫu, nó sẽ cạnh tranh với Kanamycin trên các hố đĩa cho các kháng thể Kanamycin, các kháng thể thứ cấp, gắn thẻ với một enzyme peroxidase,nhắm mục tiêu các kháng thể chính mà là phức tạp để thuốc phủ trên các giếng đĩaĐộ cường độ màu kết quả, sau khi thêm chất nền HRP (TMB), có mối quan hệ ngược với nồng độ dư lượng Kanamycin trong mẫu.
REAGENTMBộ thử nghiệm ELISA Kanamycin có khả năng xác định 96 hoặc thử nghiệm 42 mẫu trong hai bản (giả sử 12 giếng cho tiêu chuẩn).Trở lại bất kỳ microwell không sử dụng vào túi nhựa và niêm phong chúng bằng chất khô cung cấp trong gói ban đầu. Lưu trữ bộ ở nhiệt độ 2- 8 °C *. Thời hạn sử dụng là 12 tháng khi bộ được lưu trữ đúng cách.
Nội dung bộ dụng cụ | Số tiền | Lưu trữ |
Bảng phủ canamycin | 1 x 96 giếng | 2-8°C |
Tiêu chuẩn Kanamycin Kiểm soát tiêu cực (tuốc CAP màu trắng) 0.2 ng/mL (chuỗi CAP màu vàng) 0.6 ng/mL (chuối CAP màu cam) 1.8 ng/mL (đường ống nắp màu hồng) 5.4 ng/mL ((đường ống mũ màu tím) 16.2 ng/mL (đường ống mũ màu xanh) 1000 ng/mL ((tăng, tùy chọn, ống mũ đỏ) |
1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml |
2-8°C
|
Kanamycin Ab#1 | 6.0mL | 2-8°C |
HRP-Conjugated Ab#2 | 6.0mL | |
10×Điều pha loãng mẫu | 15 ml | |
20× dung dịch giặt | 28mL | |
Dừng Buffer | 12 ml | |
TMB Substrate | 12 ml | |
10 × Bộ đệm mở rộng mẫu (không cần thiết) | 15ml | |
Chất dự phòng cân đối mẫu | 2 ml |
Nếu bạn không có kế hoạch sử dụng bộ dụng cụ trong hơn 1 tháng, hãy lưu trữ Kanamycin Standard Stock, Kanamycin Antibody #1 và HRP-Conjugated Antibody #2 ở nhiệt độ -20°C hoặc trong tủ lạnh.
Loại mẫu | Giới hạn phát hiện(ng/g hoặc ppb) |
Cá/ Tôm/ Thịt/ Gan/ thận | 8 |
Cell Lysate | 2 |
Nước tiểu / huyết thanh | 5 |
Sữa | 2 |
Các chất phân tích | Khả năng phản ứng chéo (%) |
Kanamycin | 100 |
Streptomycin | < 0.1 |
Dihydrostreptomycin | < 0.1 |
Neomycin | < 0.1 |
Máy đọc đĩa microtiter (450 nm)
Máy trộn mô (ví dụ Omni Tissue Master Homogenizer)
Máy trộn xoắn ốc (ví dụ: Máy trộn xoắn ốc Genie từ VWR)
10, 20, 100 và 1000 IU pipette
Đường ống thông đa kênh: 50-300 IU (Tìm chọn)
Hãy chắc chắn rằng các mẫu được lưu trữ đúng cách. Nói chung, các mẫu nên được giữ trong tủ lạnh ở nhiệt độ 2-4 °C trong không quá 1-2 ngày. Tự đông các mẫu ở nhiệt độ tối thiểu -20 °C nếu cần lưu trữ trong thời gian dài hơn.Các mẫu đông lạnh có thể được tan ở nhiệt độ phòng (20 °C / 68 °F) hoặc trong tủ lạnh trước khi sử dụng.
Lấy 100 IU lysate tế bào, thêm 900 IU của 1 × mẫu pha loãng đệm, trộn tốt.
Tránh tâm trong 5 phút ở 4000 x g.
Lấy 50 I.U. của supernatant cho mỗi giếng để xét nghiệm.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 10.
Để 1,0 g của mẫu đồng nhất, thêm 4.0mL của 1 × Sample Ext. bộ đệm,
Lôi động mẫu trong 1 phút với máy trộn xoáy.
Phân tâm mẫu trong 5 phút ở 4000 x g.
Cẩn thận chuyển 200uL của lớp trên vào một ống mới,thêm 1.375mL 1X chất pha loãng mẫu và 25uL Sample Balance Buffer, xoáy trong 30 giây.
Sử dụng 50uL mỗi giếng để phân tích.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 40.
Lấy 50uL mẫu nước tiểu hoặc huyết thanh, thêm 1,2 ml chất pha loãng 1 lần mẫu, trộn kỹ.
Tránh tâm trong 5 phút ở 4.000 x g.
Lấy 50uL của supernatant cho mỗi giếng để xét nghiệm.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng: 25.
Lưu ý: Nhân tố pha loãng:10
Quan trọng: Tất cả các chất phản ứng phải được đưa đến nhiệt độ phòng trước khi sử dụng (1 2 giờ tại20 25°C / 68 ¢ 77°F); Hãy chắc chắn đọc phần " Cảnh báo và biện pháp phòng ngừa " trêntrang3.Các dung dịch nên được chuẩn bị ngay trước khi thử nghiệm ELISA. Tất cả các phản ứng nên được trộn bằng cách đảo ngược nhẹ hoặc xoay trước khi sử dụng. Chuẩn bị khối lượng cần thiết cho số lượng giếng đang chạy.Không trả lại các chất phản ứng vào ống/thùng chứa ban đầuSử dụng hồ chứa dùng một lần khi xử lý chất phản ứng có thể giảm thiểu nguy cơ nhiễm trùng và được khuyến cáo.
Trộn 1 khối lượng dung dịch rửa 20X với 19 khối lượng nước cất.
Nhãn các dải riêng lẻ sẽ được sử dụng và các chất phản ứng theo ví dụ sau:
Thành phần | Khối lượng mỗi phản ứng | 24 Phản ứng |
Kháng thể Kanamycin #1 | 50uL | 1.2mL |
HRP-Conjugated Ab #2 | 50uL | 1.2mL |
1X dung dịch giặt | 10,0 mL | 24ml |
Dừng Buffer | 100 IU | 2.4 ml |
TMB Substrate | 100 IU | 2.4 ml |
Thêm 50 IU của mỗi tiêu chuẩn Kanamycin trong hai lần vào các giếng khác nhau (Thêm tiêu chuẩn vào đĩa chỉ theo thứ tự từ nồng độ thấp đến nồng độ cao).
Thêm 50 IU của mỗi mẫu trong hai lần vào các giếng lấy mẫu khác nhau.
Thêm 50 IU HRP-Conjugated Ab # 2 vào mỗi giếng và 50 IU Kanamycin Antibody #1 vào mỗi giếng. Trộn tốt bằng cách nhẹ nhàng lắc tấm bằng tay trong khoảng 30 giây.
ủ đĩa trong 30 phút ở nhiệt độ phòng (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F). (Tránh ánh nắng mặt trời trực tiếp và băng giá trên ghế bành trong thời gian ủ (được khuyến cáo che tấm microtiter trong khi ủ).
Rửa đĩa 4 lần với 250 IU dung dịch giặt 1X. Sau lần rửa cuối cùng, đảo ngược đĩa và nhẹ nhàng nhấn đĩa khô trên khăn giấy (Làm bước tiếp theo ngay sau khi rửa đĩa.Không cho phép tấm khô trong không khí giữa các bước làm việc).
Thêm 100 IU chất nền TMB. Thời gian phản ứng ngay sau khi thêm chất nền. Trộn dung dịch bằng cách nhẹ nhàng lắc tấm bằng tay trong 30s trong khi ủKhông đặt bất kỳ chất nền nào trở lại thùng chứa ban đầu để tránh bất kỳ sự ô nhiễm tiềm ẩn nào.Nên che tấm microtiter trong khi ủ).
Sau khi ủ trong 15 phút ở nhiệt độ phòng (20 25°C / 68 ¢ 77°F), thêm 100 IU Stop Buffer để ngăn chặn phản ứng enzyme.
Đọc bảng hiệu càng sớm càng tốt sau khi thêm Stop Buffer trên máy đọc bảng hiệu với bước sóng 450 nm (Trước khi đọc,sử dụng khăn lau không có lông trên đáy của tấm để đảm bảo không có độ ẩm hoặc dấu vân tay can thiệp vào các phép đọc).
Một đường cong tiêu chuẩn có thể được xây dựng bằng cách vẽ đường viền hấp thụ tương đối trung bình (%) thu được từ mỗi tiêu chuẩn tham chiếu so với nồng độ của nó bằng ng / mL trên đường cong logaritm.
Sự hấp thụ tương đối (%) =tiêu chuẩn hấp thụ bằng khônghoặc mẫu x 100
Sử dụng các giá trị hấp thụ tương đối trung bình cho mỗi mẫu để xác định nồng độ tương ứng của thuốc được thử nghiệm bằng ng/mL từ đường cong tiêu chuẩn.
Hình sau là đường cong tiêu chuẩn chloramphenicol điển hình.